Description
In der Reihe Praktikum der Genetik erschienen bisher Band 1, Bakterien-. Phagen- und MoZekuZargenetik. und Band 2, DrosophiZa-Genetik. Der 3. Band, Humangenetik, sollte eigentlich schon frtiher fertig gestellt sein, aber zwei Grtinde verhinderten das: Erstens konnten sich weder die Autoren noch der Herausgeber und Mit herausgeber aus der Ftille der alltaglichen Pflichten zurtick ziehen, urn sich nur dern Buch zu widrnen. Zweitens hatten aIle an dern Buch Beteiligten hochgesteckte Ziele, namlich die Human genetik in ihrer thematischen Vielfalt darzustellen; dement sprechend enthalt jetzt der vorliegende Band zytogenetische, biochemische, immunologische und rnolekularbiologische Ver suchsanleitungen. Ein kurzer Blick in einschlagige Zeitschriften lehrt uns, daB sich die Humangenetik in den letzten Jahren thematisch und methodisch sttirmisch entwickelt hat. Ftir die biologische Grund lagenforschung und die praktische Medizin, insbesondere die humangenetische Diagnostik und Beratung, hat diese Entwicklung auBerordentliche Bedeutung. So erscheint es wichtig, daB der Btichermarkt ein deutschsprachiges Buch tiber viele aktuelle Methoden der Humangenetik bereithalt. Der vorliegende Band wird diesem Bedarf gewiB gerecht. Dem Herausgeber dieses Buches, Herrn Kollegen Wolf, sowie den Autoren sei auch an dieser Stelle ftir ihren aufopfernden Arbeitseinsatz herzlich gedankt. Ebenso spreche ich dem Verlag, insbesondere Herrn Dr. Konrad F. Springer und Herrn Dr. Dieter Czeschlik, meinen herzlichen Dank ftir stetes Interesse am Zustandekommen dieses Buches und jede Art von organisatorischer Hilfe aus. I. Zytogenetik.- 1. Der mitotische Chromosomensatz des Menschen.- 1.1 Lymphozytenkultur.- 1.2 Identifizierung der menschlichen Chromosomen in homogen gefrbten Metaphasen.- 1.3 Einfhrung in die Diagnostik von Chromosomenaberrationen anhand homogen gefrbter Metaphasen.- 1.4 Darstellung und Analyse von Bandenmusterkaryotypen.- 1.4.1 Darstellung von Bandenmustern auf Metaphasechromosomen.- 1.4.2 Karyotypanalyse anhand von Metaphasen mit Bandenmustern.- bungsaufgaben.- 2. Diagnostik an Interphasezellen.- 2.1 Darstellung des X-Chromatins.- 2.1.1 Bestimmung von X-Chromatin in Mundschleimhaut-abstrichen.- 2.1.2 Bestimmung von X-Chromatin an Zellen des Haarbulbus.- 2.2 Darstellung des Y-Chromatins.- 2.2.1 Bestimmung von Y-Chromatin an Zellen der Haarwurzel.- 2.2.2 Bestimmung von Y-Chromatin an Blutausstrichen.- bungsaufgaben.- 3. Zellzyklus.- 3.1 Nachweis der semikonservativen DNA-Replikation und Demonstration des Schwesterchromatidaustausches.- 3.2 Darstellung von Replikationsmustern auf Metaphasechromosomen.- 3.3 Darstellung von Replikationsmustern nach Synchronisierung einer Lymphozytenkultur.- 3.4 Beschreibung des Wachstumsverlaufes einer Lymphozytenkultur nach BrdU-Substitution.- 3.5 Nachweis der DNA-Synthese in der Interphase mit 3H-Thymidin und das Prinzip der Autoradiographie.- 3.6 Darstellung der Mitosestadien und Bestimmung des Mitoseindex.- bungsaufgaben.- 4. Meiose.- 4.1 Prparation und Identifizierung der Meiosestadien aus dem Hoden der Maus.- 4.2 Meiotische Paarungsfiguren bei Maus und Hamster im Vergleich zum mitotischen Chromosomensatz.- 4.3 Darstellung von Pachytn und Metaphase I am Modell.- bungsaufgaben.- 5. Lsungen zu den bungsaufgaben.- 5.1 Der mitotische Chromosomensatz des Menschen.- 5.2 Diagnostik an Interphasezellen.- 5.3 Zellzyklus.- 5.4 Meiose.- II. Immungenetik.- 1. Grundlegende serologische Techniken am Beispiel des ABO-Systems.- 1.1 Agglutinationstest.- 1.2 Die Serumgegenprobe als eine Methode der Antikrperspezifizierung.- 1.3 Antikrpertiterbestimmung.- 1.4 Gewinnung eines monospezifischen Antiserums.- 2. Indirekte Agglutination: der Coombs-Test.- 3. Blutgruppen und Populationsgenetik.- 4. Histokompatibilitt.- 4.1 Hauttransplantation.- 4.2 Der lymphozytotoxische Test: Bestimmung von HLA-Gewebsantigenen.- 4.3 Gemischte Leukozytenkultur.- III. Biochemische Genetik Nachweis von lslichen Proteinmerkmalen.- 1. Agarosegelelektrophorese von Hmolysaten: Darstellung der Esterase D (EsD) und Phosphoglukomutase (PGM).- 2. Agarosegelelektrophorese von Seren: Darstellung des C3-Polymorphismus.- 3. Agarosegelelektrophorese von Seren mit anschliessender Immunfixation: Darstellung des Bf-Proteins.- 4. Agaroseimmunelektrophorese von Seren: Darstellung des Gc-Proteins.- 5. Isoelektrische Fokussierung von Serumproteinen. Eine weitere Methode zur Darstellung des Gc-Proteins.- 6. Quantitative Bestimmung von Alpha-Fetoprotein (AFP) in Fruchtwasserproben mit immunologischen Verfahren nach Mancini und Laurell.- IV. Molekulargenetik Genetische Diagnostik mit Hilfe von DNA-S equenzpolymorphismen.- 1. Isolierung genomischer DNA.- 2. Spaltung von DNA mit Restriktionsnukleasen.- 3. Agarosegelelektrophorese von DNA-Fragmenten.- 4. DNA-Transfer vom Agarosegel auf Nitrozellulosefilter (“Southern-Transfer”).- 5. Radioaktive Markierung von DNA durch “Nick-Translation”.- 6. Filterhybridisierung von DNA-Fragmenten mit radioaktiver DNA.- V. Anhang.- 1. Bezugsquellen.- 2. Hinweise zur Arbeitssicherheit und Unfallverhtung.- 3. Liste der verwendeten Abkrzungen.
